離子對試劑規(guī)范的選用步驟
離子對試劑主要是作用于樣品和固定相之間的一種物質(zhì)，所以在選擇離子對試劑時，要考慮色譜柱的填料和樣品的酸堿性。
離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大的影響.離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì).被分離溶質(zhì)是強酸或強堿,離子對試劑可以是強酸或強堿,弱堿或強酸,弱酸,如被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的離子對試劑必須是強堿或強酸.對于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇并沒有特殊要求.離子對試劑疏水性的差別可以通過調(diào)節(jié)離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿意的分離效果。離子對試劑用于高壓液相離子對萃取的液相色譜法分離分析強極性有機酸和有機堿的好方法。離子對試劑廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)，藥物學(xué)，和石油化工等領(lǐng)域。
離子對試劑選用步驟
1.選擇一根適合的色譜柱，常為C18柱；
2.準(zhǔn)備流動相時僅使用HPLC級別的水和色譜級試劑；
3.選擇能給出*分離度的流動相成分和濃度；
4.如果樣品中有非離子化物質(zhì)，在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況；
5.選擇合適的離子對系列試劑以提供相應(yīng)的離子配對：對于酸性分析物使用酸性離子對試劑；對于堿性分析物使用堿性離子對試劑；
6.通過比較選擇所得分離度的離子對試劑；
7.一旦離子對試劑已經(jīng)確定，調(diào)節(jié)流動相的pH值將分離度zui大化；因為微小的pH值改變對保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響，所以仔細(xì)小心的小幅度調(diào)節(jié)pH值；
8.理想狀況下，流動相中的離子對試劑濃度應(yīng)為0.005M，但是稍微增加離子對試劑可能會稍微增加保留性質(zhì)并因此優(yōu)化分離情況。
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